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1mL菌液中题述“目的菌”的数量为165÷0.2×104=8.25(3)将固定化细胞颗粒装入灭菌的反应器中，并加入灭菌牛×10(个)。由于当两个或多个细胞连在一起时，板上观奶，开始发酵。据表1中数据分析，发酵一段时间后，发酵液察到的只是一个菌落，故该方法统计的菌落数往往比活菌！H下降，乳酸菌活性受到抑制，乳酸产生的速度减慢的实际数目低。(4)据表2、表3中数据分析，采用双菌种，先分别固定再答案：(1)防止杂菌污染灼烧灭菌(2)液体聚苯乙烯：1：1混合发酵是对产酸最有利的发酵方式。(3)培养时间不足8.25×106当两个或多个细胞连在·答案：(1)无氧抗生素会抑制乳酸菌的活性，导致发酵失一起时，板上观察到的只是一个菌落败(2)透明圈与菌落直径比例大的(3)发酵一段时间18.解析：(1)由题意可知，给小鼠注射的特定抗原应取自人的后，发酵液PH下降，乳酸菌活性受到抑制(4)采用双菌乳腺癌细胞。(2)步骤①为促进动物细胞融合的过程，动物·种，先分别固定再1：1混合发酵细胞融合的方法主要有PEG融合法、电融合法和灭活病毒20.解析：(1)胚胎工程的理论基础是哺乳动物受精和早期胚诱导法。(3)获得的杂交瘤细胞必须进行步骤③克隆化培·胎发育的规律。(2)为了充分发挥雌性优良个体的繁殖潜养和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交力，可以对供体进行超数排卵处理，使其产生更多的卵细瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖又可以产生抗体，得到：胞。但毕竟供体母牛提供的卵子总量有限，因而可通过途的杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培：径②，对早期胚胎进行胚胎分割以提高胚胎的利用率。途养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处于径③中：供体1提供细胞核，供体2提供细胞质，经过核移植无菌、无毒的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还：技术形成重组细胞，并发育形成早期胚胎，再胚胎移植到受需要的气体条件是95%空气与5%二氧化碳的混合气体，二体子宫分娩出小牛，与途径①②相比，途径③中供体1可提氧化碳的主要作用是维持培养液的pH。在使用合成培养·供大量的体细胞，而卵母细胞可由体质健康和繁殖能力强基时通常需加入血清，因为我们对动物细胞代谢所需要的的本地牛提供，来源广泛。(3)样品1判定结果是雄性，样品营养物质掌握的还不是十分清楚，血清的作用是为动物细1的反应液I管和Ⅱ管都有扩增产物；样品2判定结果是雌胞培养提供未知成分。(4)单克隆抗体具有特异性强、灵敏：性，样品2的反应液Ⅱ管有扩增产物，I管没有，因此判断反度高、可大量制备的优点。图中的步骤④是将获得的单克：应液「管中加入的是特异性识别雄性特异核酸序列的引隆抗体(a)和药物(b)通过接头结合在一起，从而获得ADC。物，反应液Ⅱ管中加入的是特异性识别雌雄共同核酸序列答案：(1)人的乳腺癌细胞(2)聚乙二醇（或PEG)的引物。无论雌雄，反应液Ⅱ管中加入的是特异性识别雌(3)抗体检测无菌、无毒，95%的空气维持培养液的：雄共同核酸序列的引物，肯定会有扩增产物存在，但表格中H补充未知成分，利于动物细胞生长(4)特异性强、灵样品3、4没有扩增产物，因此需要重做。敏度高、可大量制备a答案：(1)哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律(2)超数19.解析：(1)乳酸菌属于厌氧微生物，因此发酵时需要提供无：排卵胚胎分割途径③中供体1可提供大量的体细胞，而氧条件；由于抗生素会抑制乳酸菌的活性，导致发酵失败，·卵母细胞可由体质健康和繁殖能力强的本地牛提供，来源因此发酵所用的鲜牛奶中不能含有抗生素。(2)筛选乳酸·广泛(3)特异性识别雄性特异核酸序列特异性识别雌菌高产菌株时可在固体培养基中加入碳酸钙，培养一段时！雄共同核酸序列反应液Ⅱ管中加入的是特异性识别雌雄间后，乳酸菌产生的乳酸可以将碳酸钙分解形成透明圈，选·共同核酸序列的引物，理论上无论雌雄，反应液Ⅱ管都能扩取菌落周围透明圈与菌落直径比例大的，即为高产菌株。增出产物阶段检测（九）基因工程与生物技术的安全性和伦理问题1.B将研磨液加入切碎的洋葱中，充分研磨后过滤，要弃去！C正确；不同DNA能相互拼接的基础是它们具有相同的化沉淀物，收集上清液，A错误；DNA不溶于酒精，但是细胞中，学组成（都是由脱氧核苷酸组成）和结构（双螺旋结构），的某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理可将DNA与蛋白质！D正确。进一步分离，进行DNA的粗提取，B正确；用塑料离心管可4.B实验用PCR技术对M基因进行扩增时，需要两种引物减少提取过程中DNA的损失，C错误；将白色丝状物溶解！结合M基因的两条链合成相应子链，A正确；含M的在NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后，将试管置于沸水中加！T-DNA插入到西红柿染色体DNA上，才能稳定存在和表热5min,观察颜色变化，D错误。达，而不是整个Tⅰ质粒，B错误；即使M在西红柿中成功表2.D图中的5种限制酶切割形成的末端均为黏性末端，A错！达，也必须进行个体生物学水鉴定，来确定实际效果，C正误；BamH I和Sau3AI切割形成的末端，可以相互连接，连·确；西红柿种植容易，成本低且易储存，D正确。接形成的DNA序列中还存在Sau3AI的识别序列和切割！5.C启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因位，点，故能再被Sau3AI切割，B错误；Acc65I和KpnI切的上游，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱割形成的黏性末端序列无法配对连接，C错误；Sau3AI识！动基因转录出mRNA,故构建表达载体时需将EPO基因别序列为4个碱基，而BgⅡ识别序列为6个碱基，因此分(目的基因)插入乳腺蛋白基因启动子的下游，A正确；采用别用Sa3AI和BglⅡ切割随机序列DNA,前者得到的片·基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成段长度明显短于后者，D正确。EPO,所以一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的3.A题中所述操作采用了基因工程技术，该技术至少需要三！乳腺细胞中表达，B正确；用显微注射技术将含EPO基因的种分子工具：限制酶、DNA连接酶、载体，A错误；溶葡球菌表达载体导入羊的受精卵（将来发育成雌性个体）中，待其酶基因为目的基因，获取和扩增目的基因可用PCR反应，B发育到一定阶段，方可合成EPO,C错误；用PCR扩增人正确；要使目的基因只在乳腺组织中特异性表达，在构建基！EPO基因，前提是需要一段已知的EPO基因核苷酸序列，因表达载体时，需加入乳腺中特异性表达的基因的启动子，！以便根据这一序列合成引物，D正确。202